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磁转染试剂

磁转染试剂
产品详情

                                            磁转染试剂说明书 

【产品名称】磁转染试剂

【英文名称】magnetic transfection kit

【订货信息】

货号名称浓度规格
JK-07-00150nm磁转染试剂1mg/mL100uL、500uL、1000uL
JK-07-002150nm磁转染试剂1mg/mL100uL、500uL、1000uL

 


【简  介】  

 澳门十大网赌平台科技有限公司提供高质量的 50 nm 磁转染试剂,具有高负载量以及高的表面正电荷,因而具 有高的转染效率,安全环保无污染,胶体稳定性好,同时具有优良的磁共振成像能力。产品为褐色澄清水胶 体,已采用 0.22 微米滤膜过滤除菌、操作简单、在磁标板(24 或 96 孔)作用下 易被细胞吞噬、可用于 DNA 或 RNA 的高效转染实验研究。 

【产品参数】

 1) 表面 Zeta 电位:pH 7.4 约+40 mV 

 2) 磁性:具有超顺磁性,饱和磁化强度约 60 emu/g Fe 

转染前细胞接种 为取得较高的转染效率,推荐使用 50 代以内的细胞进行转染实验。要求在转染前 24 小时对细胞再次 传代,转染时细胞密度一般应为 60-80%。请注意最佳实验条件根据细胞系不同而不同。以下建议可作为用 最短的孵育时间获得好的转染效果的指导。 

贴壁细胞(以 24 孔板为例) 

1) 1 μg DNA 质粒稀释于 100 μL 不含血清的培养基,轻轻混匀,静置 10 分钟左右。 

2) 1 μL 磁转染试剂滴加入步骤 1 的 DNA 溶液中,轻轻混匀,室温静置反应 20 分钟。 

3) 更换 24 孔板细胞的完全培养基,先用 PBS 清洗细胞一次,后加入一定体积(根据表中推荐体积, 考虑后面补加血清的体积)的不含血清和抗生素的培养基。 

4) 将 100 μL 磁转染试剂/DNA 复合物加入孔内,平晃混匀,底部加上 24 孔磁标版,放入 37℃,CO2 培养箱转染 20 分钟。 

5) 去掉底部磁标版,转染孔内补加血清,放入 37℃,CO2培养箱继续培养。 

6) 在 24 小时后洗去含转染混合物的培养基,更换新鲜培养基。 

7) 标准条件培养后,可分析报告基因转染效率。 

 

 悬浮细胞 

试剂孵育形成复合物的同时,将欲转染的细胞用培养基(有或无血清-或添加剂;根据细胞类型和细胞 对无血清条件的敏感度决定)稀释到 5×105 –1×106 /mL,用以下 3 种方法之一使细胞沉到培养皿的底部,以 增加与磁性颗粒的接触。 

1) 在多聚赖氨酸包被的板上接种细胞,按适用于贴壁细胞的实验步骤操作。 

2) 短暂离心细胞2 分钟)使其形成细胞团,然后按适用于贴壁细胞的实验步骤操作。 

3) 将细胞悬浮液与转染试剂混合,每 mL 细胞加 30uL 转染试剂孵育 10-15 分钟。操作如下: 将细胞放入置于磁标板上的组织培养皿中(含细胞的培养基的体积依培养皿规格而定;表格中建议的转 染体积),孵育 15 分钟。将制备好的 试剂/DNA 转染试剂加入细胞,这时细胞培养板依然放在磁标板 上继续孵育 15 分钟。 小心地将上清培养基从细胞中移除,加入新鲜的完全培养基,这时培养板仍旧置于磁标板上。小心不要 把由于磁力下沉的细胞吸走。 将培养板从磁标板上移开。标准条件培养后,可分析报告基因转染效率。 

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